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rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
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Sapofen
khadidja
Hayet
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:: campus :: cours :: 5eme année :: Mémoires et rapports de stage
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rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
INTRODUCTION:
Ce stage, d’une durée de deux mois, a consisté à faire une tournée aux différentes unités au sein du laboratoire de biochimie à l’établissement hospitalo universitaire d’ORAN ;
Le laboratoire central de Biochimie assure les prestations de routine et d'urgence 24h/24 auprès des malades hospitalisés.
Les activités de routine de ce laboratoire représentent 87%, essentiellement automatisée.
Ce rapport présente le travail que j’ai effectué lors de mon stage, il s’est déroulé du 02Novembre au 31 décembre 2010, pendant la période je me suis familiarisée avec un environnement technique et un ensemble d’applications, ceci va m’aider beaucoup dans mon deuxième stage au CHUO ;
Le travail réalisé s’est avéré très intéressant et très enrichissant pour mon expérience professionnelle.
Le but de ce rapport de stage n’est pas de faire uniquement une présentation exhaustive de tous les aspects techniques que j’ai pu apprendre ou approfondir mais aussi, de manière synthétique et claire, de faire un tour des aspects humains auxquels j’ai été confrontée.
Je vous expose dans ce rapport en premier lieu une présentation du laboratoire de biochimie.
Ensuite je vous explique les différents aspects de mon travail durant ces quelques mois et enfin, en conclusion, je résume les différents paramètres dosés dans différentes unités du laboratoire
REMERCIEMENTS:Tout d'abord je remercie Allah pour tous les bienfaits qu'Il m'a accordés et pour le courage qu'il m'a attribué afin de compléter ce stage.
Je remercie aussi mes Parents pour leur soutient morale et matériel pendant toute ma vie et surtout durant mes études.
Je tiens tout particulièrement à remercier mes maitres de stage Mr et Mme MESSAOUDI pour leur accueil chaleureux ainsi que notre chef de département Mr TOUMI qui m’a affectée en tant que stagiaire au sein du laboratoire de biochimie à l’EHUO ;
Mes sincères remerciements s'adressent à Dr MOUSSAOUI pour leur aimable aide et pour leur gentillesse avec nous durant la période du stage ;
Je remercie également la surveillante médicale Zoulikha pour leur soutient ;
D’une façon plus générale je remercie l’ensemble des collaborateurs du service pour les nombreux conseils qu'ils ont pu me donner durant la période que j'ai passée en leur compagnie ainsi que pour la confiance dont ils m’ont faite ;
Je souhaite en outre remercier mes professeurs à l'université pour toutes les connaissances acquises pendant nos années de formation ;
J'exprime Un remerciement exceptionnel à Youcef, Sofiane et Neila qui m’ont beaucoup aidée et soutenue pendant toute la période du stage, et pour l’intérêt qu’ils m’ont porté tout au long de mon stage ainsi que pour leur aide et précisions ;
Je remercie de même Dr BAHOUTI, les résidentes Derouiche Wassila et Merahi Imene pour leurs conseils.
je remercie mes frères Riyadh et Mohammed Chérif ainsi que mes soeurs Naziha et Noria pour leur aide.
LA RECEPTION:Un patient dans un hôpital est sous la surveillance d’un médecin du bloc « un médecin spécialiste », quand la personne hospitalisée aura besoin des analyses quelques soient leurs types, le médecin remplie une ordonnance : « prière à faire les examens suivants : … »
Un agent polyvalent ramène cette ordonnance au laboratoire de biochimie associée à un tube contenant le prélèvement sanguin mélangé avec l’anticoagulant qui convient aux analyses demandées. Les analyses biochimiques nécessitent de l’héparine comme anticoagulant
Le médecin ne doit pas oublier de mentionner sur l’ordonnance le Diagnostic de la maladie, si non elle sera refusée Aucune ordonnance ne sera acceptée sans Diagnostic ; pourquoi ??
Exemple : une personne qui souffre d’une insuffisance rénale Chronique doit avoir surement le taux de créa, urée…anormal, donc ça aide les cliniciens à juger du bon fonctionnement de leurs appareils.
L’agent doit ramener aussi avec lui le billet de salle du patient pour qu’il soit rempli par les Réceptionnistes comme suit : Exemple :
La date Le service Les examens demandés code cotation
Le 19/12/2010 Biochimie Glycémie 1346 B10
Glycémie urinaire 1391 B5
Glycémie LCR 1363 B10
Urée 1360 B10
Urée urinaire 1393 B10
Urée LCR 1367 B10
Créatinine 1340 B10
Créatinine Urinaire 1377 B10
Créa LCR 1340 B10
Albumine 1358 B10
L’agent doit ramener aussi avec lui le billet de salle du patient pour qu’il soit rempli par les Réceptionnistes comme suit : Exemple :
Donc le billet de salle de chaque patient doit contenir toutes les analyses qui lui étant faites durant son séjour à l’hôpital
Codes et cotations : ce sont des codes qu’on doit les écrire sur le billet de salle du patient à coté de chaque paramètre dosé, ça rentre dans l'assurance
Comment remettre les résultats aux autres services : les résultats en duplicata (rose et blanc) doivent êtres signés ou validés par le chef de service ou bien seulement le cachet de service, on garde le rose et on remit le blanc aux patients. Au niveau de la réception on trouve aussi des boites placées dans des étagères où on dépose les résultats ; Donc chaque service a sa boite spécifique pour lui, c’est une stratégie d’organisation du travail.
Exemple : boite du service ORL, une autre pour la réanimation….ext
En fin, la secrétaire médicale doit les enregistrer sur un ordinateur pour faire les statistiques, c’est la notion d’épidémiologie.
Les ordonnances ne doivent jamais ressortir du service, elles seront vérifiées par le chef de service
NB :
en cas de demande de l’ionogramme « K+, Na+, Cl- « », il faut vérifier que l’anticoagulant utilisé n’est pas l’héparine sodique, il doit être de l’héparine Li, car le sodium fausse les résultats.
L’hémolyse : en cas de sang hémolysé, y a plusieurs paramètres à ne pas doser :
- Ionogramme sanguin, créatinine, Mg, ASAT, ALAT , LDH, CK, GGT, PAL
Un tube avec un bouchon vert contenant de l’héparine comme anticoagulant est destiné au laboratoire de biochimie. Un tube citraté avec un bouchon bleu est destiné au laboratoire de pharmacologie ou au CTS(centre de transfusion sanguine) pour le groupage sanguin . Enfin un tube avec un bouchon violet contient l’EDTA comme anticoagulant est destiné au laboratoire d’hémobiologie.
Qu’est ce qu’ils font à la réception :
1. Un personnel reçoit :-le tube +l’ordonnance+le billet de salle
Il commence par la numérotation du tube, sachant que le nom du patient doit être écrit sur l’étiquette de ce dernier, puis on écrit le même numéro sur l’ordonnance, pour organiser et faciliter le travail, à fin de ne pas confondre entre l’ordonnance et les tubes, exemple : le 1er tube qu’ils reçoivent en début de la journée prend le numéro 01, on mentionne 01 sur l’ordonnance.
2. Puis un autre personnel va remplir le billet de salle
3. à la fin ils vont remplir un registre par le nom du patient, la date doit être mentionnée et les analyses à faire.
L'UNITE DE BIOCHIMIE GENERALE:
Après avoir récupéré les tubes de la réception, ils vont êtres acheminés vers l’unité de Biochimie générale où se trouve la centrifugeuse ;
Utilisation principale de la centrifugeuse :
La centrifugeuse permet de séparer des éléments solides ou cellulaires et des éléments liquides.
Principe de fonctionnement :
Le tube d'échantillon est placé dans un rotor, lui même placé dans la cuve de la centrifugeuse. L’accélération produite par la rotation entraîne les particules les plus lourdes vers le fond du tube, ce qui permet de séparer le culot du surnageant.
Explication :
Les analyses biochimiques doivent êtres réalisées sur le sérum, on doit centrifuger notre prélèvement sanguin ;
-Un personnel récupère les tubes remplis du sang de la réception et il les traite au niveau de la centrifugeuse ; Le principe de cet appareil est basé sur la notion de l’équilibre, il contient deux poste-tubes ronds, chacun contient en maximum 6tubes
-On met en place les tubes à condition que chaque deux tubes opposés doivent contenir contiennent le même niveau de sang -Si on ne peut pas faire cela on équilibre avec des tubes secs remplis avec de l’eau distillée.
Donc dans la centrifugeuse : un tube sanguin doit avoir en face de lui soit :
1- un autre tube contenant le même niveau de sang
2- un tube sec contenant de l’eau dans le même niveau que le tube à analyser
Entretien : La qualité des analyses peut être affectée par un appareil sale (risque de contaminations croisées). La cuve de la centrifugeuse (si elle est présente, car elle n'existe pas sur le modèle manuel), le rotor et les accessoires doivent être nettoyés et désinfectés régulièrement ;
N.B : - On doit répartir convenablement les tubes dans le rotor pour éviter des déséquilibres. En effet un déséquilibre dans le chargement du rotor (tubes plus lourd d’un côté que de l’autre) peut avoir des conséquences dramatiques : rupture de l’axe et expulsion du rotor à grande vitesse, d’où le risque de dommages dans le laboratoire et de blessures du personnel.
-la durée de la centrifugation est de trois minutes
L'IONOGRAMME:Les tubes récupérés de la centrifugeuse doivent êtres envoyés vers l’ILYTE ou le CX9, ça dépend des analyses que le patient en a besoin.
La balance électrolytique est une donnée essentielle dans l’évaluation des désordres hydro-électrolytiques. Une variation importante de la concentration des différents électrolytes est liée à des maladies sous-jacentes.
C’est pourquoi il est très important de mesurer directement les électrolytes en utilisant une technique rapide, facile et précise.
L’ionogramme est un examen de laboratoire qui analyse la concentration en électrolytes d’un liquide organique (sang, urines, liquide céphalo-rachidien). Ces électrolytes sont des sels capables de se dissocier en solution pour former des ions. Ces ions sont de deux types :
• les cations (ions positifs attirés par la cathode) tels que :
o le sodium Na+,
o le potassium K+,
• les anions tels que :
o le chlorure Cl-
C'est un examen biologique très courant et très utile pour dépister les troubles ioniques qui surviennent dans les maladies rénales, hormonales, les troubles de l'hydratation, les troubles gastro-intestinaux (diarrhée, vomissements), les malnutritions, et dans toute perturbation de l’équilibre acido-basique de l’organisme.
Cet examen fait partie des éléments de surveillance d'un malade, sous traitement (diurétiques par exemple)
*Ionogrammes Sanguins :
Paramètre Valeurs habituelles
Na+ 135- 145Mmol/l
K+ 3.5 - 05 Mmol/l
Cl- 95–105 Mmol/l
* Ionogrammes Urinaires :
Paramètre Valeurs habituelles
Na+ 40-220 Mmol/l
K+ 25-120 Mmol/l
Cl- 110-250 Mmol/l
Conditions de l’ionogramme sanguin
Le prélèvement sanguin se fait à jeun (pour certains paramètres uniquement) sur sang veineux dans un tube sec (sérum) ou avec anticoagulant (héparine de lithium pour conservation du plasma). L'acheminement au laboratoire s'effectue rapidement afin d'éviter toute hémolyse. L'échantillon sera centrifugé (pour obtention du plasma seul) ou non (sang total)
Appareil utilisé : ILYT.
Type de prélèvement à analyser : soit le sérum soit les urines
Principe : nécessite Chaque jour un calibrage avec un sérum de contrôle normal et un autre pathologique c'est-à-dire un nettoyage quotidien pour le contrôle de la qualité de l’appareil
• Les normes du sérum de contrôle normal : Na+ : 132-142 K+ : 3.5 - 4.1 Cl- : 97-107
• Les normes du sérum Pathologique: Na+ : 151-161 K+ : 5.6 – 6.2 Cl- : 118-128
Maintenance et utilisation simples
L’utilisation et la maintenance ne peuvent être plus simples. Seules deux touches de fonction, “Yes” ou “No” guident l’utilisateur à travers chaque procédure. Moins d’une minute est nécessaire pour maîtriser son utilisation. Les électrodes sans maintenance se remplacent facilement. Pour des raisons de sécurité.
Résultats dans la minute
ILyteTM mesure les électrolytes en une minute
Les résultats sont indiqués sur un afficheur alphanumérique
lors des procédures de routine. Par simple pression de la touche “YES”, l’appareil aspire automatiquement le sang et il l’analyse en moins d’une minute.
LE CX9 BECKMEN COULTER: Définition : c’est un analyseur chimique on peut dire que cet appareil est le cœur du laboratoire de biochimie car il est utilisé dans le d dosage de tous les paramètres dans ce laboratoire sauf les hormones et l’homocysteine.
Les paramètres dosés par le CX9 sont les suivants :
Albumine, micro Albumine, Phosphatase Alcaline, ALAT-ASAT, Ca, Fe, Mg, Phosphore, cholestérol, LDL, HDL, TG, créa kinase, créatinine, urée, A.urique, Electrolyte tampon, lipase, lactate, PAM(amylase pancréatique), CKMB, CRP, bilirubine Directe, Bilirubine Totale, GGT, le glucose, MTP, protéine totale, TP3 totale.
Mode opératoire :
Le calibrage : le Cx 9 nécessite un calibrage quotidien à plusieurs niveaux, pour assurer son bon fonctionnement
La manipulation : un biologiste rempli les godets à l’aide d’une micropipette avec le sérum de chaque patient
La programmation du logiciel : un technicien prend en charge la programmation du logiciel.
LE MANUEL: Appareil utilisé: le spectrophotomètre dans le visible
Avant l’entrée des échantillons dans l’appareil il faut le calibrer : ça se fait avec un blanc réactif pour ajuster le zéro du spectrophotomètre
Chaque paramètre nécessite un réglage précis :
Paramètre Longueur d’onde concentration
00 Glucose 500 1
01 Urée 580 0.50
02 Protéine 540 70
03 Albumine 63 50
I. La courbe d’étalonnage : Le dosage de l’urée sanguin :
C’est une méthode colorimétrique en spectrophotomètre visible
Le principe :
L’urée est hydrolysée enzymatiquement en ammoniac NH4+ et le dioxyde de carbone CO2.
Les ions d’ammoniac formés agissent avec le salicylate et hypochlorite NaClO, en présence de nitroprusside comme catalyseur pour former l’indophénol de couleur verte ;
Urée + H2O (NH4+) 2 + CO2
NH4+ + Salycilate +NaClO Indophenol
Mode opératoire :
- préparation de la solution mère : dissoudre 2g d’urée dans 1L d’eau distillée, on obtient une solution de concentration égale à 2g/L.
- préparation de 5 solutions filles de concentration différentes à partir de la solution mère :
Solutions filles 1 2 3 4 5
Concentration (g/l) 0.1 0.2 0.4 0.8 1.2
Volume prélevé (ml) 0.05 0.10 0.20 0.40 0.60
Volume d’eau ajouté (ml) 0.95 0.90 0.80 0.60 0.40
- les réactifs :
R1 Phosphate pH 6.7
EDTA
Sodium salicylate
Sodium nitroprusside
R2 Sodium hypochlorite NaClO Sodium hydroxide
R3 Urease
STANDARD Standard
Procedures:
- La solution de travail: dissoudre R3 dans R1, agiter lentement afin d’avoir une dissolution complète, sachant que la stabilité de cette solution est de 4 semaines dans le réfrigérateur (2a80C) ou 7 jours à la température ambiante. De ce fait il faut mentionner la date d’ouverture et de préparation.
Blanc Standard Echantillon (solutions filles)
Solution de travail (ml) 1.0 1.0 1.0
Standard (µl) -- 10 --
Echantillon (µl) -- -- 10
-laisser incuber 5min à T0 de 370C ou 10min à température ambiante, ajouter le R2(NaClO).
Blanc Standard Echantillon (solutions filles)
R2 (ml) 1.0 1.0 1.0
-bien mélanger puis laisser incuber 5min à température de 370C ou 10min à température ambiante.
Le spectrophotomètre :
• La longueur d’onde : 580nm.
• Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur le blanc réactif.
• Placer les solutions filles dans le spectrophotomètre de plus petite concentration vers la plus grande.
• La lecture des densités optiques.
Solutions filles 1 2 3 4 5
Concentration (g/l) 0.1 0.2 0.4 0.8 1.2
DO 0.111 0.173 0.383 0.734 1.017
puis vs déssinez la courbe car je ne peux pas la poster(l'excel)
Remarque : dans ce cas là on n’a pas employé un échantillon, on a juste fait le principe de la courbe d’étalonnage, mais quand on l’utilise, on extrait la concentration de ce dernier par extrapolation directe de la courbe.
Le type d’échantillon : sérum ou bien plasma
II. Dosage du Glucose sanguin par la méthode analytique :
Glucose + O2 + H2O par glucose oxydase nous donne l'Acide glucuronique + H2O2
2 H2O2 +Phénol+ 4-amino-antipyrine par la peroxydase nous donne Quinoneimine(rose) + 4H2O
Mode opératoire :
Réactifs :
R1 (solution tampon phénol) Tampon Tris pH = 7
R2 (enzymes) Glucose oxydase
Péroxydase
Amino 4-antipyrine
R3 (standard) Glucose
Préparation :
-Solution de travail : On va dissoudre le lyophilisat R2 dans le tampon R1, protéger de la lumière
-La stabilité du réactif du travail : 8semaines à la température de laboratoire et 8mois à 2-80C ? N’oubliez jamais de mentionner la date d’ouverture du flacon.
Blanc Standard Echantillon
Standard --- 10µl ---
Echantillon --- --- 10µl
Réactif de travail 1ml 1ml 1ml
- bien mélanger puis laisser incuber 10min à température de 370C ou 30min à température ambiante.
N.B : on a utilisé un Echantillon et deux sérums de contrôle ; normal et pathologique
-le sérum de contrôle utilisé en biochimie est un sérum bovin lyophilisé qui contient plusieurs composants à des concentrations adéquates pour le contrôle de la qualité dans les laboratoires et qui ne contient pas de conservateur qui peuvent interférer dans les déterminations, il est fourni avec intervalle de valeurs acceptables.
Le spectrophotomètre :
• La longueur d’onde : 500nm
• Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur le blanc réactif.
• Placer les échantillons dans le spectrophotomètre
Calcul :
Glucose = Do Echantillon/ Do standard * n
n = 100 en mg/dl
n = 1 en g/l
n = 5.56 en mmol/l
Le glucose est supérieur à la normale, les valeurs normales sont entre 0.77 et 1.26, donc le sujet est diabétique.
HORMONOLOGIE: ACCESS BECKMAN COULTER
Access2 Beckman coulter est l’appareil qui effectue les dosages des hormones dans le laboratoire de biochimie à l’EHUO
Ça nécessite une simple manipulation avant l’envoi à l’access2.
Il est utilisé pour le dosage des hormones suivantes :
Thyroïde : T3, T4, Anti TPO.
Fertilité : FSH, LH, Prolactine, Œstradiol, Progestérone, Testostérone.
Grossesse : BHCG.
Cortisol sanguin et urinaire.
Ferritinémie.
Et aussi le dosage des Facteurs tumoraux :
-CA 15-3 : Ag circulant associé au tissu mammaire.
-CA 19-9 : Ag circulant associé cancer du pancréas et du colon.
-CA 125 : Ag circulant associé cancer de l’ovaire.
-ACE : Ag circulant associé au cancer du colon et rectum
- αfoeto protéine : est une glycoprotéine du sérum fœtal : cancer du foie et du testicule.
-Le prélèvement est acheminé vers l’unité d’hormonologie en tube sec sans anticoagulant.
-Puis doivent subir une centrifugation comme on en a parlé auparavant
-après cette étape, on rempli nos godets avec les sérums des patients
Le travail doit être organisé avec des étiquettes et des fiches pour chaque malade
CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE A HAUTE PERFORMANCE:
HPLC est utilisé pour le dosage de l’Homocysteine, ce dernier est un acide aminé soufré résultant du catabolisme de la méthionine ou de la cystathionine. Son nom provient de sa structure analogue avec la cystéine.
Principe
L'échantillon à analyser est poussé par un liquide (appelée phase mobile) dans une colonne remplie d'une phase stationnaire de fine granulométrie (les "grains" sont de très petite taille). Le débit d'écoulement de la phase mobile est élevé ce qui entraîne une augmentation de la pression dans le système. Ce débit élevé diminue le temps nécessaire pour séparer les composants le long de la phase stationnaire. La fine granulométrie de la phase stationnaire permet une meilleure séparation des composants. Souvent, la composition de la phase mobile est modifiée au cours de l'analyse, c'est le mode dit "gradient" ou "élution graduée
Appareillage et fonctionnement :
La pompe : C’est la partie qui sert à stocker l'éluant et à l'injecter sous pression dans la colonne.
L'injecteur: Des tubes en acier inoxydable permettent de relier la ou les pompes à l'injecteur. Il y a plusieurs types d'injecteurs.
La colonne : c’est le cœur de l’HPLC Elle dépend du type de chromatographie en phase liquide que l'on veut faire et donc de la nature et du nombre de composés que l'on veut séparer. Il peut y avoir plusieurs colonnes parallèles. Il y a donc plusieurs types de chromatographies en phase liquide.
La phase stationnaire est composées d'un matériau poreux (petites particules de silice ou de polymères), les molécules dont le diamètre est supérieur à celui des pores ne peuvent pénétrer et ne sont pas retenues. La durée de séjour dans la colonne augmente lorsque la taille des analytes diminue.
Le détecteur : Il existe plusieurs types de détecteurs :
• Détecteur à absorption UV ou visible
• Détecteur à fluorescence
La qualité et la durée d'une séparation peuvent changer avec la nature de la phase stationnaire et de la phase mobile utilisées. Mais pour un même type de phase stationnaire et une même phase mobile, la qualité et la durée d'une séparation peuvent aussi être modifiées par les caractéristiques géométriques et opératoires de ces deux phases
LA BIOLOGIE MOLECULAIRE:
L’extraction de l’ADN :
Extraire l'ADN des protéines par un mélange phénol-chloroforme A partir du sang
faire éclater les globules rouges du sang par choc osmotique en le mélangeant à une solution hypotonique
récupérer des globules blancs par centrifugation
ajouter un mélange de détergent (SDS ou Sarcosyl) et de protéinase K ; le détergent détruira les membranes et la protéinase digérera les protéines associées à l'ADN
ajouter des sels pour augmenter la force ionique puis précipitation de l'ADN par l'alcool éthylique absolu froid (-20°C).
L'ADN précipite sous forme de filaments, visibles à l'œil nu, qui sont récupérés par enroulement sur une baguette de verre. Redissoudre l'ADN dans une solution tamponnée. L'ADN peut être ainsi conservée à 4°C plus d'un an.
Remarque : la taille des fragments engendrés par les cassures mécaniques au cours de cette extraction est supérieure à 20kB. Le rendement de cette méthode est de quelques centaines de microgrammes d'ADN pour 10 à 20 ml de sang.
Attention : éviter de congeler l'ADN génomique, la congélation provoquant de nombreuses cassures de la molécule.
Remarque :
Les contaminations sont minimisées par le port de gants, l'utilisation de vaisselle et de solutions stériles et/ou traitées au DEPC (agent inhibiteur des RNAses).
supplémentaire: J’avais aussi la chance d’apprendre la réalisation du prélevement sanguin en utilisant la seringue, un garrot et des tubes bien sur.
CONCLUSION:
Je remercie Allah qui m’a donné le courage et la santé pour terminer ce travail;
Mon passage par ce service était quelque chose inexplicable, je suis très satisfaite de la propreté du service, de son organisation, de la politesse du personnel là-bas, de l’enthousiasme et l’immense collaboration entre eux ;
C’était une expérience inoubliable que j’ai passée dans ma vie ;
Mes souhaits pour tout le monde là-bas sont la réussite et un bon avenir inchalah ainsi que la continuité du travail que j’ai bien aimé.
Ce stage, d’une durée de deux mois, a consisté à faire une tournée aux différentes unités au sein du laboratoire de biochimie à l’établissement hospitalo universitaire d’ORAN ;
Le laboratoire central de Biochimie assure les prestations de routine et d'urgence 24h/24 auprès des malades hospitalisés.
Les activités de routine de ce laboratoire représentent 87%, essentiellement automatisée.
Ce rapport présente le travail que j’ai effectué lors de mon stage, il s’est déroulé du 02Novembre au 31 décembre 2010, pendant la période je me suis familiarisée avec un environnement technique et un ensemble d’applications, ceci va m’aider beaucoup dans mon deuxième stage au CHUO ;
Le travail réalisé s’est avéré très intéressant et très enrichissant pour mon expérience professionnelle.
Le but de ce rapport de stage n’est pas de faire uniquement une présentation exhaustive de tous les aspects techniques que j’ai pu apprendre ou approfondir mais aussi, de manière synthétique et claire, de faire un tour des aspects humains auxquels j’ai été confrontée.
Je vous expose dans ce rapport en premier lieu une présentation du laboratoire de biochimie.
Ensuite je vous explique les différents aspects de mon travail durant ces quelques mois et enfin, en conclusion, je résume les différents paramètres dosés dans différentes unités du laboratoire
REMERCIEMENTS:Tout d'abord je remercie Allah pour tous les bienfaits qu'Il m'a accordés et pour le courage qu'il m'a attribué afin de compléter ce stage.
Je remercie aussi mes Parents pour leur soutient morale et matériel pendant toute ma vie et surtout durant mes études.
Je tiens tout particulièrement à remercier mes maitres de stage Mr et Mme MESSAOUDI pour leur accueil chaleureux ainsi que notre chef de département Mr TOUMI qui m’a affectée en tant que stagiaire au sein du laboratoire de biochimie à l’EHUO ;
Mes sincères remerciements s'adressent à Dr MOUSSAOUI pour leur aimable aide et pour leur gentillesse avec nous durant la période du stage ;
Je remercie également la surveillante médicale Zoulikha pour leur soutient ;
D’une façon plus générale je remercie l’ensemble des collaborateurs du service pour les nombreux conseils qu'ils ont pu me donner durant la période que j'ai passée en leur compagnie ainsi que pour la confiance dont ils m’ont faite ;
Je souhaite en outre remercier mes professeurs à l'université pour toutes les connaissances acquises pendant nos années de formation ;
J'exprime Un remerciement exceptionnel à Youcef, Sofiane et Neila qui m’ont beaucoup aidée et soutenue pendant toute la période du stage, et pour l’intérêt qu’ils m’ont porté tout au long de mon stage ainsi que pour leur aide et précisions ;
Je remercie de même Dr BAHOUTI, les résidentes Derouiche Wassila et Merahi Imene pour leurs conseils.
je remercie mes frères Riyadh et Mohammed Chérif ainsi que mes soeurs Naziha et Noria pour leur aide.
LA RECEPTION:Un patient dans un hôpital est sous la surveillance d’un médecin du bloc « un médecin spécialiste », quand la personne hospitalisée aura besoin des analyses quelques soient leurs types, le médecin remplie une ordonnance : « prière à faire les examens suivants : … »
Un agent polyvalent ramène cette ordonnance au laboratoire de biochimie associée à un tube contenant le prélèvement sanguin mélangé avec l’anticoagulant qui convient aux analyses demandées. Les analyses biochimiques nécessitent de l’héparine comme anticoagulant
Le médecin ne doit pas oublier de mentionner sur l’ordonnance le Diagnostic de la maladie, si non elle sera refusée Aucune ordonnance ne sera acceptée sans Diagnostic ; pourquoi ??
Exemple : une personne qui souffre d’une insuffisance rénale Chronique doit avoir surement le taux de créa, urée…anormal, donc ça aide les cliniciens à juger du bon fonctionnement de leurs appareils.
L’agent doit ramener aussi avec lui le billet de salle du patient pour qu’il soit rempli par les Réceptionnistes comme suit : Exemple :
La date Le service Les examens demandés code cotation
Le 19/12/2010 Biochimie Glycémie 1346 B10
Glycémie urinaire 1391 B5
Glycémie LCR 1363 B10
Urée 1360 B10
Urée urinaire 1393 B10
Urée LCR 1367 B10
Créatinine 1340 B10
Créatinine Urinaire 1377 B10
Créa LCR 1340 B10
Albumine 1358 B10
L’agent doit ramener aussi avec lui le billet de salle du patient pour qu’il soit rempli par les Réceptionnistes comme suit : Exemple :
Donc le billet de salle de chaque patient doit contenir toutes les analyses qui lui étant faites durant son séjour à l’hôpital
Codes et cotations : ce sont des codes qu’on doit les écrire sur le billet de salle du patient à coté de chaque paramètre dosé, ça rentre dans l'assurance
Comment remettre les résultats aux autres services : les résultats en duplicata (rose et blanc) doivent êtres signés ou validés par le chef de service ou bien seulement le cachet de service, on garde le rose et on remit le blanc aux patients. Au niveau de la réception on trouve aussi des boites placées dans des étagères où on dépose les résultats ; Donc chaque service a sa boite spécifique pour lui, c’est une stratégie d’organisation du travail.
Exemple : boite du service ORL, une autre pour la réanimation….ext
En fin, la secrétaire médicale doit les enregistrer sur un ordinateur pour faire les statistiques, c’est la notion d’épidémiologie.
Les ordonnances ne doivent jamais ressortir du service, elles seront vérifiées par le chef de service
NB :
en cas de demande de l’ionogramme « K+, Na+, Cl- « », il faut vérifier que l’anticoagulant utilisé n’est pas l’héparine sodique, il doit être de l’héparine Li, car le sodium fausse les résultats.
L’hémolyse : en cas de sang hémolysé, y a plusieurs paramètres à ne pas doser :
- Ionogramme sanguin, créatinine, Mg, ASAT, ALAT , LDH, CK, GGT, PAL
Un tube avec un bouchon vert contenant de l’héparine comme anticoagulant est destiné au laboratoire de biochimie. Un tube citraté avec un bouchon bleu est destiné au laboratoire de pharmacologie ou au CTS(centre de transfusion sanguine) pour le groupage sanguin . Enfin un tube avec un bouchon violet contient l’EDTA comme anticoagulant est destiné au laboratoire d’hémobiologie.
Qu’est ce qu’ils font à la réception :
1. Un personnel reçoit :-le tube +l’ordonnance+le billet de salle
Il commence par la numérotation du tube, sachant que le nom du patient doit être écrit sur l’étiquette de ce dernier, puis on écrit le même numéro sur l’ordonnance, pour organiser et faciliter le travail, à fin de ne pas confondre entre l’ordonnance et les tubes, exemple : le 1er tube qu’ils reçoivent en début de la journée prend le numéro 01, on mentionne 01 sur l’ordonnance.
2. Puis un autre personnel va remplir le billet de salle
3. à la fin ils vont remplir un registre par le nom du patient, la date doit être mentionnée et les analyses à faire.
L'UNITE DE BIOCHIMIE GENERALE:
Après avoir récupéré les tubes de la réception, ils vont êtres acheminés vers l’unité de Biochimie générale où se trouve la centrifugeuse ;
Utilisation principale de la centrifugeuse :
La centrifugeuse permet de séparer des éléments solides ou cellulaires et des éléments liquides.
Principe de fonctionnement :
Le tube d'échantillon est placé dans un rotor, lui même placé dans la cuve de la centrifugeuse. L’accélération produite par la rotation entraîne les particules les plus lourdes vers le fond du tube, ce qui permet de séparer le culot du surnageant.
Explication :
Les analyses biochimiques doivent êtres réalisées sur le sérum, on doit centrifuger notre prélèvement sanguin ;
-Un personnel récupère les tubes remplis du sang de la réception et il les traite au niveau de la centrifugeuse ; Le principe de cet appareil est basé sur la notion de l’équilibre, il contient deux poste-tubes ronds, chacun contient en maximum 6tubes
-On met en place les tubes à condition que chaque deux tubes opposés doivent contenir contiennent le même niveau de sang -Si on ne peut pas faire cela on équilibre avec des tubes secs remplis avec de l’eau distillée.
Donc dans la centrifugeuse : un tube sanguin doit avoir en face de lui soit :
1- un autre tube contenant le même niveau de sang
2- un tube sec contenant de l’eau dans le même niveau que le tube à analyser
Entretien : La qualité des analyses peut être affectée par un appareil sale (risque de contaminations croisées). La cuve de la centrifugeuse (si elle est présente, car elle n'existe pas sur le modèle manuel), le rotor et les accessoires doivent être nettoyés et désinfectés régulièrement ;
N.B : - On doit répartir convenablement les tubes dans le rotor pour éviter des déséquilibres. En effet un déséquilibre dans le chargement du rotor (tubes plus lourd d’un côté que de l’autre) peut avoir des conséquences dramatiques : rupture de l’axe et expulsion du rotor à grande vitesse, d’où le risque de dommages dans le laboratoire et de blessures du personnel.
-la durée de la centrifugation est de trois minutes
L'IONOGRAMME:Les tubes récupérés de la centrifugeuse doivent êtres envoyés vers l’ILYTE ou le CX9, ça dépend des analyses que le patient en a besoin.
La balance électrolytique est une donnée essentielle dans l’évaluation des désordres hydro-électrolytiques. Une variation importante de la concentration des différents électrolytes est liée à des maladies sous-jacentes.
C’est pourquoi il est très important de mesurer directement les électrolytes en utilisant une technique rapide, facile et précise.
L’ionogramme est un examen de laboratoire qui analyse la concentration en électrolytes d’un liquide organique (sang, urines, liquide céphalo-rachidien). Ces électrolytes sont des sels capables de se dissocier en solution pour former des ions. Ces ions sont de deux types :
• les cations (ions positifs attirés par la cathode) tels que :
o le sodium Na+,
o le potassium K+,
• les anions tels que :
o le chlorure Cl-
C'est un examen biologique très courant et très utile pour dépister les troubles ioniques qui surviennent dans les maladies rénales, hormonales, les troubles de l'hydratation, les troubles gastro-intestinaux (diarrhée, vomissements), les malnutritions, et dans toute perturbation de l’équilibre acido-basique de l’organisme.
Cet examen fait partie des éléments de surveillance d'un malade, sous traitement (diurétiques par exemple)
*Ionogrammes Sanguins :
Paramètre Valeurs habituelles
Na+ 135- 145Mmol/l
K+ 3.5 - 05 Mmol/l
Cl- 95–105 Mmol/l
* Ionogrammes Urinaires :
Paramètre Valeurs habituelles
Na+ 40-220 Mmol/l
K+ 25-120 Mmol/l
Cl- 110-250 Mmol/l
Conditions de l’ionogramme sanguin
Le prélèvement sanguin se fait à jeun (pour certains paramètres uniquement) sur sang veineux dans un tube sec (sérum) ou avec anticoagulant (héparine de lithium pour conservation du plasma). L'acheminement au laboratoire s'effectue rapidement afin d'éviter toute hémolyse. L'échantillon sera centrifugé (pour obtention du plasma seul) ou non (sang total)
Appareil utilisé : ILYT.
Type de prélèvement à analyser : soit le sérum soit les urines
Principe : nécessite Chaque jour un calibrage avec un sérum de contrôle normal et un autre pathologique c'est-à-dire un nettoyage quotidien pour le contrôle de la qualité de l’appareil
• Les normes du sérum de contrôle normal : Na+ : 132-142 K+ : 3.5 - 4.1 Cl- : 97-107
• Les normes du sérum Pathologique: Na+ : 151-161 K+ : 5.6 – 6.2 Cl- : 118-128
Maintenance et utilisation simples
L’utilisation et la maintenance ne peuvent être plus simples. Seules deux touches de fonction, “Yes” ou “No” guident l’utilisateur à travers chaque procédure. Moins d’une minute est nécessaire pour maîtriser son utilisation. Les électrodes sans maintenance se remplacent facilement. Pour des raisons de sécurité.
Résultats dans la minute
ILyteTM mesure les électrolytes en une minute
Les résultats sont indiqués sur un afficheur alphanumérique
lors des procédures de routine. Par simple pression de la touche “YES”, l’appareil aspire automatiquement le sang et il l’analyse en moins d’une minute.
LE CX9 BECKMEN COULTER: Définition : c’est un analyseur chimique on peut dire que cet appareil est le cœur du laboratoire de biochimie car il est utilisé dans le d dosage de tous les paramètres dans ce laboratoire sauf les hormones et l’homocysteine.
Les paramètres dosés par le CX9 sont les suivants :
Albumine, micro Albumine, Phosphatase Alcaline, ALAT-ASAT, Ca, Fe, Mg, Phosphore, cholestérol, LDL, HDL, TG, créa kinase, créatinine, urée, A.urique, Electrolyte tampon, lipase, lactate, PAM(amylase pancréatique), CKMB, CRP, bilirubine Directe, Bilirubine Totale, GGT, le glucose, MTP, protéine totale, TP3 totale.
Mode opératoire :
Le calibrage : le Cx 9 nécessite un calibrage quotidien à plusieurs niveaux, pour assurer son bon fonctionnement
La manipulation : un biologiste rempli les godets à l’aide d’une micropipette avec le sérum de chaque patient
La programmation du logiciel : un technicien prend en charge la programmation du logiciel.
LE MANUEL: Appareil utilisé: le spectrophotomètre dans le visible
Avant l’entrée des échantillons dans l’appareil il faut le calibrer : ça se fait avec un blanc réactif pour ajuster le zéro du spectrophotomètre
Chaque paramètre nécessite un réglage précis :
Paramètre Longueur d’onde concentration
00 Glucose 500 1
01 Urée 580 0.50
02 Protéine 540 70
03 Albumine 63 50
I. La courbe d’étalonnage : Le dosage de l’urée sanguin :
C’est une méthode colorimétrique en spectrophotomètre visible
Le principe :
L’urée est hydrolysée enzymatiquement en ammoniac NH4+ et le dioxyde de carbone CO2.
Les ions d’ammoniac formés agissent avec le salicylate et hypochlorite NaClO, en présence de nitroprusside comme catalyseur pour former l’indophénol de couleur verte ;
Urée + H2O (NH4+) 2 + CO2
NH4+ + Salycilate +NaClO Indophenol
Mode opératoire :
- préparation de la solution mère : dissoudre 2g d’urée dans 1L d’eau distillée, on obtient une solution de concentration égale à 2g/L.
- préparation de 5 solutions filles de concentration différentes à partir de la solution mère :
Solutions filles 1 2 3 4 5
Concentration (g/l) 0.1 0.2 0.4 0.8 1.2
Volume prélevé (ml) 0.05 0.10 0.20 0.40 0.60
Volume d’eau ajouté (ml) 0.95 0.90 0.80 0.60 0.40
- les réactifs :
R1 Phosphate pH 6.7
EDTA
Sodium salicylate
Sodium nitroprusside
R2 Sodium hypochlorite NaClO Sodium hydroxide
R3 Urease
STANDARD Standard
Procedures:
- La solution de travail: dissoudre R3 dans R1, agiter lentement afin d’avoir une dissolution complète, sachant que la stabilité de cette solution est de 4 semaines dans le réfrigérateur (2a80C) ou 7 jours à la température ambiante. De ce fait il faut mentionner la date d’ouverture et de préparation.
Blanc Standard Echantillon (solutions filles)
Solution de travail (ml) 1.0 1.0 1.0
Standard (µl) -- 10 --
Echantillon (µl) -- -- 10
-laisser incuber 5min à T0 de 370C ou 10min à température ambiante, ajouter le R2(NaClO).
Blanc Standard Echantillon (solutions filles)
R2 (ml) 1.0 1.0 1.0
-bien mélanger puis laisser incuber 5min à température de 370C ou 10min à température ambiante.
Le spectrophotomètre :
• La longueur d’onde : 580nm.
• Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur le blanc réactif.
• Placer les solutions filles dans le spectrophotomètre de plus petite concentration vers la plus grande.
• La lecture des densités optiques.
Solutions filles 1 2 3 4 5
Concentration (g/l) 0.1 0.2 0.4 0.8 1.2
DO 0.111 0.173 0.383 0.734 1.017
puis vs déssinez la courbe car je ne peux pas la poster(l'excel)
Remarque : dans ce cas là on n’a pas employé un échantillon, on a juste fait le principe de la courbe d’étalonnage, mais quand on l’utilise, on extrait la concentration de ce dernier par extrapolation directe de la courbe.
Le type d’échantillon : sérum ou bien plasma
II. Dosage du Glucose sanguin par la méthode analytique :
Glucose + O2 + H2O par glucose oxydase nous donne l'Acide glucuronique + H2O2
2 H2O2 +Phénol+ 4-amino-antipyrine par la peroxydase nous donne Quinoneimine(rose) + 4H2O
Mode opératoire :
Réactifs :
R1 (solution tampon phénol) Tampon Tris pH = 7
R2 (enzymes) Glucose oxydase
Péroxydase
Amino 4-antipyrine
R3 (standard) Glucose
Préparation :
-Solution de travail : On va dissoudre le lyophilisat R2 dans le tampon R1, protéger de la lumière
-La stabilité du réactif du travail : 8semaines à la température de laboratoire et 8mois à 2-80C ? N’oubliez jamais de mentionner la date d’ouverture du flacon.
Blanc Standard Echantillon
Standard --- 10µl ---
Echantillon --- --- 10µl
Réactif de travail 1ml 1ml 1ml
- bien mélanger puis laisser incuber 10min à température de 370C ou 30min à température ambiante.
N.B : on a utilisé un Echantillon et deux sérums de contrôle ; normal et pathologique
-le sérum de contrôle utilisé en biochimie est un sérum bovin lyophilisé qui contient plusieurs composants à des concentrations adéquates pour le contrôle de la qualité dans les laboratoires et qui ne contient pas de conservateur qui peuvent interférer dans les déterminations, il est fourni avec intervalle de valeurs acceptables.
Le spectrophotomètre :
• La longueur d’onde : 500nm
• Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur le blanc réactif.
• Placer les échantillons dans le spectrophotomètre
Calcul :
Glucose = Do Echantillon/ Do standard * n
n = 100 en mg/dl
n = 1 en g/l
n = 5.56 en mmol/l
Le glucose est supérieur à la normale, les valeurs normales sont entre 0.77 et 1.26, donc le sujet est diabétique.
HORMONOLOGIE: ACCESS BECKMAN COULTER
Access2 Beckman coulter est l’appareil qui effectue les dosages des hormones dans le laboratoire de biochimie à l’EHUO
Ça nécessite une simple manipulation avant l’envoi à l’access2.
Il est utilisé pour le dosage des hormones suivantes :
Thyroïde : T3, T4, Anti TPO.
Fertilité : FSH, LH, Prolactine, Œstradiol, Progestérone, Testostérone.
Grossesse : BHCG.
Cortisol sanguin et urinaire.
Ferritinémie.
Et aussi le dosage des Facteurs tumoraux :
-CA 15-3 : Ag circulant associé au tissu mammaire.
-CA 19-9 : Ag circulant associé cancer du pancréas et du colon.
-CA 125 : Ag circulant associé cancer de l’ovaire.
-ACE : Ag circulant associé au cancer du colon et rectum
- αfoeto protéine : est une glycoprotéine du sérum fœtal : cancer du foie et du testicule.
-Le prélèvement est acheminé vers l’unité d’hormonologie en tube sec sans anticoagulant.
-Puis doivent subir une centrifugation comme on en a parlé auparavant
-après cette étape, on rempli nos godets avec les sérums des patients
Le travail doit être organisé avec des étiquettes et des fiches pour chaque malade
CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE A HAUTE PERFORMANCE:
HPLC est utilisé pour le dosage de l’Homocysteine, ce dernier est un acide aminé soufré résultant du catabolisme de la méthionine ou de la cystathionine. Son nom provient de sa structure analogue avec la cystéine.
Principe
L'échantillon à analyser est poussé par un liquide (appelée phase mobile) dans une colonne remplie d'une phase stationnaire de fine granulométrie (les "grains" sont de très petite taille). Le débit d'écoulement de la phase mobile est élevé ce qui entraîne une augmentation de la pression dans le système. Ce débit élevé diminue le temps nécessaire pour séparer les composants le long de la phase stationnaire. La fine granulométrie de la phase stationnaire permet une meilleure séparation des composants. Souvent, la composition de la phase mobile est modifiée au cours de l'analyse, c'est le mode dit "gradient" ou "élution graduée
Appareillage et fonctionnement :
La pompe : C’est la partie qui sert à stocker l'éluant et à l'injecter sous pression dans la colonne.
L'injecteur: Des tubes en acier inoxydable permettent de relier la ou les pompes à l'injecteur. Il y a plusieurs types d'injecteurs.
La colonne : c’est le cœur de l’HPLC Elle dépend du type de chromatographie en phase liquide que l'on veut faire et donc de la nature et du nombre de composés que l'on veut séparer. Il peut y avoir plusieurs colonnes parallèles. Il y a donc plusieurs types de chromatographies en phase liquide.
La phase stationnaire est composées d'un matériau poreux (petites particules de silice ou de polymères), les molécules dont le diamètre est supérieur à celui des pores ne peuvent pénétrer et ne sont pas retenues. La durée de séjour dans la colonne augmente lorsque la taille des analytes diminue.
Le détecteur : Il existe plusieurs types de détecteurs :
• Détecteur à absorption UV ou visible
• Détecteur à fluorescence
La qualité et la durée d'une séparation peuvent changer avec la nature de la phase stationnaire et de la phase mobile utilisées. Mais pour un même type de phase stationnaire et une même phase mobile, la qualité et la durée d'une séparation peuvent aussi être modifiées par les caractéristiques géométriques et opératoires de ces deux phases
LA BIOLOGIE MOLECULAIRE:
L’extraction de l’ADN :
Extraire l'ADN des protéines par un mélange phénol-chloroforme A partir du sang
faire éclater les globules rouges du sang par choc osmotique en le mélangeant à une solution hypotonique
récupérer des globules blancs par centrifugation
ajouter un mélange de détergent (SDS ou Sarcosyl) et de protéinase K ; le détergent détruira les membranes et la protéinase digérera les protéines associées à l'ADN
ajouter des sels pour augmenter la force ionique puis précipitation de l'ADN par l'alcool éthylique absolu froid (-20°C).
L'ADN précipite sous forme de filaments, visibles à l'œil nu, qui sont récupérés par enroulement sur une baguette de verre. Redissoudre l'ADN dans une solution tamponnée. L'ADN peut être ainsi conservée à 4°C plus d'un an.
Remarque : la taille des fragments engendrés par les cassures mécaniques au cours de cette extraction est supérieure à 20kB. Le rendement de cette méthode est de quelques centaines de microgrammes d'ADN pour 10 à 20 ml de sang.
Attention : éviter de congeler l'ADN génomique, la congélation provoquant de nombreuses cassures de la molécule.
Remarque :
Les contaminations sont minimisées par le port de gants, l'utilisation de vaisselle et de solutions stériles et/ou traitées au DEPC (agent inhibiteur des RNAses).
supplémentaire: J’avais aussi la chance d’apprendre la réalisation du prélevement sanguin en utilisant la seringue, un garrot et des tubes bien sur.
CONCLUSION:
Je remercie Allah qui m’a donné le courage et la santé pour terminer ce travail;
Mon passage par ce service était quelque chose inexplicable, je suis très satisfaite de la propreté du service, de son organisation, de la politesse du personnel là-bas, de l’enthousiasme et l’immense collaboration entre eux ;
C’était une expérience inoubliable que j’ai passée dans ma vie ;
Mes souhaits pour tout le monde là-bas sont la réussite et un bon avenir inchalah ainsi que la continuité du travail que j’ai bien aimé.
Hayet- Analeptique
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
félicitations Hayet
bon courage pour le prochain stage
bon courage pour le prochain stage
khadidja- Panacée
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
mes félicitations HAYET
Sapofen- Adjuvent
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
merci, j'ai vu qu'il n y a aucun rapport de stage publié sur pharmavie, c pr ça jlai posté pr ls personnes qui l'auront besoin, ça m'a trop fatiguée, profitez en
Hayet- Analeptique
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
je pense que tu as passé vraiment un bon stage;c'est un exellent travail pr moi ,continue HAYET
Sapofen- Adjuvent
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
Sapofen a écrit:je pense que tu as passé vraiment un bon stage;c'est un exellent travail pr moi ,continue HAYET
quand on trouve l'endroit favorable pr travailler, on le fait, l'EHUO était top, fga3 ls cotés, hygiène, travail,personnel, lah ybarak, on dirai que j'étais en france,pas l'algérie, "lah ydawamha"; ce qui m'a encouragé pr donner à fond
Hayet- Analeptique
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
mela ALLAH ydewem ds les autres services bonne chance
Sapofen- Adjuvent
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
ett bien!
il faut dire ke c mon jour de chance hayet!
je te remercie beaucoup pour avoir pris la peine de publier ton merveilleux travail sur pharmavie,
- je viens moi aussi d'entamer mon stage en unité de biochimie(EHU) et faut dire que la, chui : complètement perdue! mais vraiment, je voulais avoir un tracé ou un schéma m'indiquant par ou ca commence! et vers ou ca se termine??? je me suis trouvé avec des appareils,supper compliqués, un personnel tres occupé, et j'ai pas vraiment eu la peine de leurs poser des questions,,,, !!
ET là, un samedi soir, je me connecte et .....qu'est ce?......... RAPPORT DE SATGE BIOCHIME EHU ..pas de panique!!!...... !!!
MILLE MERCI hayet en lisant ce ke t'as ecris on a tout de suite l'impression d'etre en face a qq'un qui a vraiment apprécier son stage, qui s'est donner à fond! et cela fait plaisir,.....et ca m'encourrage de faire pareil!
bonne continuation,
il faut dire ke c mon jour de chance hayet!
je te remercie beaucoup pour avoir pris la peine de publier ton merveilleux travail sur pharmavie,
- je viens moi aussi d'entamer mon stage en unité de biochimie(EHU) et faut dire que la, chui : complètement perdue! mais vraiment, je voulais avoir un tracé ou un schéma m'indiquant par ou ca commence! et vers ou ca se termine??? je me suis trouvé avec des appareils,supper compliqués, un personnel tres occupé, et j'ai pas vraiment eu la peine de leurs poser des questions,,,, !!
ET là, un samedi soir, je me connecte et .....qu'est ce?......... RAPPORT DE SATGE BIOCHIME EHU ..pas de panique!!!...... !!!
MILLE MERCI hayet en lisant ce ke t'as ecris on a tout de suite l'impression d'etre en face a qq'un qui a vraiment apprécier son stage, qui s'est donner à fond! et cela fait plaisir,.....et ca m'encourrage de faire pareil!
bonne continuation,
green- Analeptique
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Localisation : ds la troisième planète la plus rapprochée du Soleil,foyer de l'humanité....devinez!
Date d'inscription : 12/02/2009
Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
je t'en prie, ton msg m'a fais enormément plaisir, ta de la chance comme meme, si tu veux meme je te l'envoyerai sur hotmail comme fichier word avc les photos des appareils et tous
bon, mes conseils pour toi:
au début on était tous boulversé comme toi, surtt il ne faut pas etre timide; ya des gens qui peuvent t'aider, sympa, comme Youcef,Sofiane,Neila,Soumia, ls résidentes: wassila et imene, meme Dr BAHOUTI ns a bcp aidés
ahhhhhhhh!!! je pense qu'ils font la garde ces gens là, c leurs tours, ouffffffff!!! ça change donc, bon!!si vous restez timide vous n'allez rien faire
y a un ouvrage à la bibio bio médicale 250 paramètres à doser" c pr ls analyses faites ds ls labo", vous allez en tirer profit je t'assure, vs en apprenez l'interet du dosage de chaque paramètre.
ça c 1, 2èment commence par la réception, 2 ou 3jrs sont suffisants, yak vs faites 1jr sur 2,,,,,puis vous passez vers la centrifugeuse ensuite vers l'ionogramme(calibrage et analyses); une matiné suffit
vas voir aussi avc Mr MOUSSAOUI: il vs expliquera l'HPLC en 1e matiné( pratiquement c cool)
le CX9: rien à connaitre, c le role du technicien
unité hormono:on l'a fais en 1e semaine avc sofiane et nawel, ds gens sympa, meme ya maintenant 2filles qui sont gentilles, elles peuvent vs aider, mais surtout demandez l'aide!!!
enfin, la biologie moléculaire:comment extraire l'ADN, ns on l'a pas vu, car ça se déroule en 2étapes et on était en période d'éxamen
mai faites "khatra 3la khatra" la courbe d'étalonnage aussi avec ls résidentes, elles vs aideront bcp
si vs voulez meme, faire ls analyses pr vous, apprenez comment faire un prélevement.
profitez le maximum, vs n'etes pas affectés chez eux pr etre en chaume.
bref!!! je te souhaite une bonne chance et bcp de courage
bon, mes conseils pour toi:
au début on était tous boulversé comme toi, surtt il ne faut pas etre timide; ya des gens qui peuvent t'aider, sympa, comme Youcef,Sofiane,Neila,Soumia, ls résidentes: wassila et imene, meme Dr BAHOUTI ns a bcp aidés
ahhhhhhhh!!! je pense qu'ils font la garde ces gens là, c leurs tours, ouffffffff!!! ça change donc, bon!!si vous restez timide vous n'allez rien faire
y a un ouvrage à la bibio bio médicale 250 paramètres à doser" c pr ls analyses faites ds ls labo", vous allez en tirer profit je t'assure, vs en apprenez l'interet du dosage de chaque paramètre.
ça c 1, 2èment commence par la réception, 2 ou 3jrs sont suffisants, yak vs faites 1jr sur 2,,,,,puis vous passez vers la centrifugeuse ensuite vers l'ionogramme(calibrage et analyses); une matiné suffit
vas voir aussi avc Mr MOUSSAOUI: il vs expliquera l'HPLC en 1e matiné( pratiquement c cool)
le CX9: rien à connaitre, c le role du technicien
unité hormono:on l'a fais en 1e semaine avc sofiane et nawel, ds gens sympa, meme ya maintenant 2filles qui sont gentilles, elles peuvent vs aider, mais surtout demandez l'aide!!!
enfin, la biologie moléculaire:comment extraire l'ADN, ns on l'a pas vu, car ça se déroule en 2étapes et on était en période d'éxamen
mai faites "khatra 3la khatra" la courbe d'étalonnage aussi avec ls résidentes, elles vs aideront bcp
si vs voulez meme, faire ls analyses pr vous, apprenez comment faire un prélevement.
profitez le maximum, vs n'etes pas affectés chez eux pr etre en chaume.
bref!!! je te souhaite une bonne chance et bcp de courage
Hayet- Analeptique
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Localisation : ORAN
Date d'inscription : 03/04/2009
Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
je ne peux m'empecher de te remercier encore une fois,,,
je tacherai a faire de mon mieu en suivant tes conseils si précieux!
et puis bon courage pour ton autre stage
je tacherai a faire de mon mieu en suivant tes conseils si précieux!
et puis bon courage pour ton autre stage
green- Analeptique
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Localisation : ds la troisième planète la plus rapprochée du Soleil,foyer de l'humanité....devinez!
Date d'inscription : 12/02/2009
Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
[quote="green"]je ne peux m'empecher de te remercier encore une fois,,,
je tacherai a faire de mon mieu en suivant tes conseils si précieux!
et puis bon courage pour ton autre stage [/quote
je t'en prie, merci et bon courage à toi aussi
je tacherai a faire de mon mieu en suivant tes conseils si précieux!
et puis bon courage pour ton autre stage [/quote
je t'en prie, merci et bon courage à toi aussi
Hayet- Analeptique
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Date d'inscription : 03/04/2009
Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
A quoi sa sert ce rapport ?
Thiziri- Panacée
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
bonj.
désolé, ton rapport de stage etait magnifique, je te félicité
moi aussi, j'était avec toi dans le service, j'ai fait un rapport accéptable, mais excusez moi, ce que vous venez de lancer que le stage était magnifique, et que vs avez pratiquer et que....
je suis absolument contre, le service de biochimie en général soit à l'EHUO ou autre, vs n'allez rien à faire, et rien à apprendre autant que des internes, car tout est automatisé, ç'a sert à quoi de prendre le protocole et d'esseyer de le déchiffrer ensuite de mélanger et de....
donc, en conclusion pr futurs internes, un conseil: ne choisissez pas biochimie, aller faire réanimation chez Dr dellaoui mieux de faire biochimie chez massoudi, au moins vs gagnez votre détente, ni pointage à la rentrée et à la sortie comme biochimie, ni un personnel moins niveau que vs( biologiste comme zoulikha) qui vs ordonne de faire ce- ci et de ne pas faire ce la et de ne pas s'absenter, en disant que c'est elle chef de service
ah, mes confreres les pharmaciens, allez y voir nos confreres les internes en médecine ou meme en chirurgie dentaire, si les infirmiers font comme la surveillante......jamais
ns les pharmaciens ont est perdu.
désolé, ton rapport de stage etait magnifique, je te félicité
moi aussi, j'était avec toi dans le service, j'ai fait un rapport accéptable, mais excusez moi, ce que vous venez de lancer que le stage était magnifique, et que vs avez pratiquer et que....
je suis absolument contre, le service de biochimie en général soit à l'EHUO ou autre, vs n'allez rien à faire, et rien à apprendre autant que des internes, car tout est automatisé, ç'a sert à quoi de prendre le protocole et d'esseyer de le déchiffrer ensuite de mélanger et de....
donc, en conclusion pr futurs internes, un conseil: ne choisissez pas biochimie, aller faire réanimation chez Dr dellaoui mieux de faire biochimie chez massoudi, au moins vs gagnez votre détente, ni pointage à la rentrée et à la sortie comme biochimie, ni un personnel moins niveau que vs( biologiste comme zoulikha) qui vs ordonne de faire ce- ci et de ne pas faire ce la et de ne pas s'absenter, en disant que c'est elle chef de service
ah, mes confreres les pharmaciens, allez y voir nos confreres les internes en médecine ou meme en chirurgie dentaire, si les infirmiers font comme la surveillante......jamais
ns les pharmaciens ont est perdu.
sarouche- Remontant
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
Je pensais la même chose Sarouche on dirait que Hayet a fait son stage en France
Thiziri- Panacée
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
sarouche a écrit:bonj.
désolé, ton rapport de stage etait magnifique, je te félicité
moi aussi, j'était avec toi dans le service, j'ai fait un rapport accéptable, mais excusez moi, ce que vous venez de lancer que le stage était magnifique, et que vs avez pratiquer et que....
je suis absolument contre, le service de biochimie en général soit à l'EHUO ou autre, vs n'allez rien à faire, et rien à apprendre autant que des internes, car tout est automatisé, ç'a sert à quoi de prendre le protocole et d'esseyer de le déchiffrer ensuite de mélanger et de....
donc, en conclusion pr futurs internes, un conseil: ne choisissez pas biochimie, aller faire réanimation chez Dr dellaoui mieux de faire biochimie chez massoudi, au moins vs gagnez votre détente, ni pointage à la rentrée et à la sortie comme biochimie, ni un personnel moins niveau que vs( biologiste comme zoulikha) qui vs ordonne de faire ce- ci et de ne pas faire ce la et de ne pas s'absenter, en disant que c'est elle chef de service
ah, mes confreres les pharmaciens, allez y voir nos confreres les internes en médecine ou meme en chirurgie dentaire, si les infirmiers font comme la surveillante......jamais
ns les pharmaciens ont est perdu.
ma chère sarouche il ne faut pas comparer des choses incomparables"chacun ds sa place,que ce soit ds médecins ou des biologistes"
pr le service, peut être que j'ai un petit peu exagéré,mais c'est ma façon de voir les choses, il faut comme même être optimiste les amis, en fait!!!le service de biochimie du CHUO est une catastrophe, moi je suis partie à l'EHUO pour faire mon stage, c.à.d d'essayer de voir comment ça marche là-bas, et hamdoulah j'en suis satisfaite,j'ai appris pleine de choses et j'ai trouvé des gens sympa qui m'ont encouragé"même si c des biologistes"que je respecte , et pr l'hygiène rien à dire,propre et joli
concernant la réa, celui qui ne veut pas faire un stage pdt 2mois il le fait
c'est mon opinion
Hayet- Analeptique
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
Thiziri a écrit: Je pensais la même chose Sarouche on dirait que Hayet a fait son stage en France
ghir f l'algérie wndiro lgalbe
Hayet- Analeptique
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
On commence un memoire par les remerciemments???
C'est quoi la glycémie urinaire??
Tu n'as remercié Allah que deux fois c'est trop peu a mon avis.
C'est quoi la glycémie urinaire??
Tu n'as remercié Allah que deux fois c'est trop peu a mon avis.
Esculape- Panacée
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
Esculape a écrit:On commence un memoire par les remerciemments???
C'est quoi la glycémie urinaire??
Tu n'as remercié Allah que deux fois c'est trop peu a mon avis.
1.ce n'est pas un mémoire
2.c'est le 1er rapport de stage que j'ai fait dans ma vie
3.faute de frappe; glucose urinaire
4.c vrai 2remerciements sont peu pr ALLAH, mais je le remercie tous les jours
mais pourquoi toutes ces remarques, je ne suis pas professeur pour faire un travail parfait"jai pas dit qu'il est sans faute, je suis un être humain", c'est juste un exemple de "rapp" pour aider les autres
merci comme même.
Hayet- Analeptique
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
Tu fais ce que tu veux mon amie.Tu n'avais qu'a ne pas poster si tu as peur des remarques.Ou alors tu n'acceptes que les bonnes critiques??
Esculape- Panacée
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
lol, je n'en ai pas peur, mais j'ai trouvé qu'une seule remarque dans sa place
et si vous voulez encore me critiquer y a pas de soucis, le voilà mon travail et scrutez le, en fait!!le forum a été créé pr ça
et si vous voulez encore me critiquer y a pas de soucis, le voilà mon travail et scrutez le, en fait!!le forum a été créé pr ça
Hayet- Analeptique
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Re: rapport de stage(biochimieEHU2010)présenté par MAHMOUD HAYAT
Tu voulais que ton travail soit salué comme une oeuvre scientifique inégalée.Et bien je vais t'applaudir et te souhaiter d'autres succés.
Apres avoir lu ton oeuvre on peut mourir!!!
Apres avoir lu ton oeuvre on peut mourir!!!
Esculape- Panacée
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